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021-50276769小伙伴們大家好，上一次液相維護(hù)小貼士的系列文章中，我們聊過(guò)了紫外檢測(cè)器，今天我們來(lái)說(shuō)一說(shuō)示差折光檢測(cè)器。
示差折光檢測(cè)器（Refractive Index Detector, RID）屬于中等靈敏度濃度型檢測(cè)器，其響應(yīng)值取決于柱后流出液折射率的變化，采用含有樣品的流出液與不含樣品的流出液的折射率的示差而測(cè)定。由于每種物質(zhì)都有各自的折射率，因此示差折光檢測(cè)器對(duì)所有物質(zhì)都有響應(yīng)，是一種通用型檢測(cè)器，具有廣泛的適用范圍。
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示差折光檢測(cè)器的原理
RID是一種偏轉(zhuǎn)式或者斯涅爾式折射率檢測(cè)器。斯涅爾定律指出，平行光束沿著一個(gè)大于零的入射角通過(guò)一個(gè)將兩種具有不同折射率的介質(zhì)分開(kāi)的電介質(zhì)界面時(shí)，其折射率將與兩種介質(zhì)的折射率差幅成函數(shù)關(guān)系。
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示差折光檢測(cè)器的結(jié)構(gòu)
1、鎢燈 2、聚光透鏡 3、狹縫 4、準(zhǔn)直鏡
5、狹縫 6、檢測(cè)池 7、反光鏡 8、零位玻璃 9、光敏接收元件
低功率、長(zhǎng)壽命的鎢燈發(fā)射出的光線經(jīng)過(guò)準(zhǔn)直透鏡和狹縫后，通過(guò)參比池（參照池）和樣品池（樣本池），經(jīng)平面鏡反射回來(lái)后，再次通過(guò)光學(xué)單元，最后通過(guò)透鏡聚焦到一對(duì)光傳感二極管上（光傳感器）。在測(cè)試期間，參比池和樣品池中充滿流動(dòng)相。參比池隨后與流路隔開(kāi)，流動(dòng)相僅流過(guò)樣品池。如果兩個(gè)池中介質(zhì)的折射率沒(méi)有差異，光線在通過(guò)它們時(shí)將不會(huì)發(fā)生折射。
1 | 光束 |
2 | 樣本池 |
3 | 參照池 |
4 | 光軸（Ns>Nr） |
5 | 光軸（Ns=Nr） |
6 | Distance between...（4）和（5）在光傳感器處的間距 |
7 | 光傳感器 |
Ns：樣本池中流動(dòng)相的折射率
Nr：參照池中流動(dòng)相的折射率
光線照射到一對(duì)光電二極管上，其中每個(gè)光電二極管都將給出一個(gè)電信號(hào)。隨后這些信號(hào)會(huì)被放大，從而測(cè)得兩個(gè)信號(hào)之間的差異。如果是零折射，這些信號(hào)之間的差異應(yīng)該為零伏。借助一個(gè)電控機(jī)械聯(lián)動(dòng)裝置，用戶可以通過(guò)光路中的折射透鏡來(lái)優(yōu)化光電二極管的零偏轉(zhuǎn)輸出。還可以通過(guò)額外電路輕松地將信號(hào)輸出校正為電子零點(diǎn)。
1 | 光傳感器A |
2 | 光傳感器B |
3 | 光束 |
當(dāng)流動(dòng)相的折射率發(fā)生變化時(shí)，通過(guò)樣品池和參比池之間界面的光將被折射，從而使一個(gè)光電二極管上的光強(qiáng)增大，另一個(gè)電二極管上的光強(qiáng)減小。這種差異產(chǎn)生具有振幅和極性的信號(hào)，此信號(hào)被放大后，可以驅(qū)動(dòng)圖表記錄儀。
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示差折光檢測(cè)器的應(yīng)用范圍
示差折光檢測(cè)器是一種通用型檢測(cè)器，只要被測(cè)組分與洗脫液的折光指數(shù)有差別就可使用。生命科學(xué)中常遇到各類糖類化合物，沒(méi)有紫外吸收，一般常用示差折光檢測(cè)器，她的通用性比UVD廣，但靈敏度要低，對(duì)溫度變化敏感，并與梯度洗脫不相容，因而限制了它的使用。
應(yīng)用一：麥芽糖、果糖、葡萄糖、異麥芽糖、麥芽三糖
色譜條件
色譜柱：月旭Xtimate® NH2（4.6×300，5μm）。
流動(dòng)相：乙腈:水=75:25；
檢測(cè)器：RID；
柱溫：30℃；
流速：1.0ml/min；
進(jìn)樣量：50μL。
色譜圖
應(yīng)用二：磷酸果糖二鈉、蔗糖、葡萄糖、果糖
色譜條件
色譜柱：月旭Xtimate® sugar-Ca（7.8×300mm，8μm）。
流動(dòng)相：純水；
檢測(cè)器：RID；
溫度：柱溫75℃，檢測(cè)器40℃；
流速：0.2ml/min；
進(jìn)樣量：10μL。
色譜圖
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示差折光檢測(cè)器的使用注意事項(xiàng)
示差折光檢測(cè)器主要受溫度、流速以及流動(dòng)相的種類等因素的影響，應(yīng)設(shè)法控制以上幾個(gè)因素，穩(wěn)定性會(huì)大有改善。
流動(dòng)相一定要混勻，而且要充分脫氣，用單元泵。
有條件的話將溶劑瓶、柱溫箱、檢測(cè)器的光學(xué)單元溫度控制在同一個(gè)溫度，且高于室溫5~10℃。不要將檢測(cè)器放置在通風(fēng)櫥或是空調(diào)出風(fēng)口處。
環(huán)境溫度不要變化太大，實(shí)驗(yàn)室門窗關(guān)閉，如果沒(méi)有柱溫箱那就把檢測(cè)器溫度調(diào)低一點(diǎn)。
把廢液瓶和溶劑瓶放在示差檢測(cè)器與泵以上位置，這樣可以使樣品池略有壓力，有助于優(yōu)化檢測(cè)器性能。
在安裝示差檢測(cè)器時(shí)，由于其流通池的耐壓比較低，所以示差檢測(cè)器在流路系統(tǒng)里必須放在最后。如果還要在系統(tǒng)里增加一個(gè)檢測(cè)器，必須放在示差檢測(cè)器的前面，以防壓力增大時(shí)損壞示差檢測(cè)器的流通池。
同時(shí)建議在運(yùn)輸或搬運(yùn)示差檢測(cè)器到其他場(chǎng)所時(shí)，流通池里裝有異丙醇， 這是為避免在周圍環(huán)境溫度降低時(shí)使流通池破裂。
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示差折光檢測(cè)器參數(shù)
流量范圍：1~5mL/min；
流通池容量：8μL；
檢測(cè)范圍：0.25~512μ RIU；
線性范圍：600μ RIU；
漂移：0.2μ RIU/h；
噪聲：2.5 nRIU；
通訊端口：RS232C；
接觸液體的材料：316SS，Teflon，Glass；
操作條件：10~35℃，10~80%RH。
月旭科技示差折光檢測(cè)器（訂貨號(hào)5000.0440）可兼容眾多品牌液相色譜儀，是您通用分析的不er選擇。
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